冷冻保存细胞之方法？
人食管平滑肌细胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细人食管平滑肌细胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells说明书！

人食管平滑肌细胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells

     产品描述：人食道平滑肌细胞提取于人食道组织，平滑肌的主要功能是负责空腔脏器的收缩，如、胃肠道、膀胱以及子宫等器官。它的结构与骨骼肌有很大的不同。人食管壁包括三层，外纵形和内环形，中间肌层是黏膜层。人食管的蠕动是由严格控制。公司提供的人食管平滑肌原代细胞均来自新鲜组织，用于培养人食管平滑肌原代细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人食管平滑肌细胞培养试剂盒(HumanEsophagealPrimaCell:NormalEsophagealSmoothMuscleCellsCatNo.3-0148)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，人食管平滑肌原代细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。

【培养指南】
人食管平滑肌细胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9801 人脉络膜细胞完全培养基 100mL紫花前胡苷（标准品）Nodakenin质量规格：HPLC≥98%，标准品

滋养层细胞培养基TM-prf紫蓳灵（标准品）Corynoline质量规格：HPLC≥98%，标准品

EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人细胞裂解液 (阳性对照) 紫云英苷（标准品）Astragaline质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠上皮细胞完全培养基 100mL棕榈酸（标准品）Palmitic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品

CV-1细胞，非洲绿猴肾细胞 HPAC(人*癌细胞) CM-H010人小气道上皮细胞完全培养基100mL王不留行黄酮苷（标准品）Vaccarin质量规格：HPLC≥98%，标准品

CL-0289MDA-MB-435(人癌高转移细胞)5×106cells/瓶×2甘丙肽，大鼠Galanin, rat质量规格：>95%,BR

TT细胞，髓性细胞 人成巨核细胞细胞,MEG-01细胞 人急性淋巴母细胞性细胞;MOLT-4甘丙肽(1-13)-神经肽Y(25-36)酰胺(M32)Galanin (1-13)-Neuropeptide Y(25-36), amide (M32)质量规格：>95%,BR

4T1(小鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×2甘丙肽信号关联肽（1-41）酰胺；Preprogalanin(65-105)酰胺Galanin Message Associated Peptide (1-41), amide; Preprogalanin(65-105), amide质量规格：>95%,BR

MME Others Human 人 CD10 / MME / Neprilysin 人细胞裂解液 (阳性对照) 胃泌素Ⅰ（1-14），人Gastrin I (1-14) (human)质量规格：>95%,BR

人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1胃泌素释放肽，人Gastrin Releasing Peptide,human质量规格：>95%,BR

ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 噻螨酮标准溶液(10μg/ml,u=6%)质量规格：10μg/ml,u=6%Hexythiazox solution

CL-0213SK-MES-1(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2抑霉唑标准溶液(100μg/ml,u=2%)质量规格：100μg/ml,u=2%Imazalil solution

NCI-H446细胞，小细胞 人血液细胞,TF-1细胞 人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1三氧化二铬(>99%，BR)质量规格：>99%，BRChromium (III) oxide

A549(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2四氧化三钴(>99%，BR)质量规格：>99%，BRCobalt (II, III ) oxide

CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸钴四水(>99.5%,BR)质量规格：>99.5%,BRCobaltous acetate, tetrahydrate

人食管平滑肌细胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCellsPECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人细胞裂解液 (阳性对照) 对羟基苯乙酰胺（标准品）质量规格：供检查用4-Hydroxyphenylacetamide

小气道上皮细胞生长添加物SAEpiCGS奋乃静（标准品）质量规格：含量测定Prochlorperazine

MIF Others Human 人 MIF / GLIF 人细胞裂解液 (阳性对照) 奋乃静质量规格：>98%,BRProchlorperazine

CRFK 猫肾上皮细胞TGX221质量规格：>98%,特异性的p110β抑制剂TGX-221

T-111B木瓜蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL地奥司明质量规格：HPLC≥90%,BRDiosimin

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。