抗体的生物素化标记实验要点：

1. 线粒体内钙结合天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白抗体费用 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-SLC25A13 

中文名称   线粒体内钙结合天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白抗体费用 

别    名  ARALAR2; Calcium binding mitochondrial carrier protein Aralar2; Citrin; CTLN2; Ctrn; Mitochondrial aspartate glutamate carrier 2; RGD1565889; Solute carrier family 25 (citrin) member 13; Solute carrier family 25 member 13 (citrin); Solute carrier family 25 member 13; AI785475; CMC2_HUMAN.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse 

产品类型   一抗  

研究领域     细胞生物 免疫学 神经生物学 结合蛋白 线粒体

蛋白分子量  predicted molecular weight: 74kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SLC25A13 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

线粒体内钙结合天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白抗体费用 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 SLC25A13 is a member of the mitochondrial carrier family. It contains four EF-hand Ca(2+) binding motifs in the N-terminal domain, and localizes to mitochondria. It catalyzes the exchange of aspartate for glutamate and a proton across the inner mitochondrial membrane, and is stimulated by calcium on the external side of the inner mitochondrial membrane. Mutations in the SLC25A13 gene result in citrullinemia, type II. Multiple transcript variants encoding different isoforms have been found for this gene.

Function : Catalyzes the calcium-dependent exchange of cytoplasmic glutamate with mitochondrial aspartate across the mitochondrial inner membrane. May have a function in the urea cycle.

Subcellular Location : Mitochondrion inner membrane; Multi-pass membrane protein.

Tissue Specificity : High levels in liver and low levels in kidney, pancreas, placenta, heart and brain.

DISEASE : Defects in SLC25A13 are the cause of citrullinemia type 2 (CTLN2) [MIM:603471]. Citrullinemia belongs to the urea cycle disorders. It is an autosomal recessive disease characterized primarily by elevated serum and urine citrulline levels. Ammonia intoxication is another manifestation. CTLN2 is characterized by neuropsychiatric symptoms including abnormal behaviors, loss of memory, seizures and coma. Death can result from brain edema. Onset is sudden and usually between the ages of 20 and 50 years.

Defects in SLC25A13 are the cause of neonatal intrahepatic cholestasis due to citrin deficiency (NICCD) [MIM:605814]. NICCD is a form of citrullinemia type 2 with neonatal onset. NICCD is characterized by suppression of the bile flow, hepatic fibrosis, low birth weight, growth retardation, hypoproteinemia, variable liver dysfunction. NICCD is generally not severe and symptoms disappear by one year of age with an appropriate diet. Years or even decades later, however, some individuals develop the characteristic features of citrullinemia type 2 with neuropsychiatric symptoms.

Similarity : Belongs to the mitochondrial carrier family.

Contains 4 EF-hand domains.

Contains 3 Solcar repeats.

Citrin是一种线粒体内钙结合天冬氨酸/谷氨酸载体(Aspartate/ Glutamate Carrier, AGC)蛋白，在尿素循环及其他代谢过程中发挥重要作用。Citrin缺乏症包含成年发作Ⅱ型 瓜氨酸血症(Adult Onset Type Ⅱ Citrullinemia , CTLN2)和Citrin缺乏所致新生儿内胆汁淤积症( Neonatal Intrahepatic Cholestasis caused by Citrin Deficiency, NICCD)两种不同表型，为常染色体隐性遗传。

Citrin分子量约为74kDa，含675个氨基酸，在脏、*及中均有表达，位于线粒体内膜。Citrin的N端有4个EF手型结构域，可结合钙离子，C端作为线粒体载体活性部位有6个跨膜结构。研究还发现，Citrin的类似物－Aralar，同为天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白，虽氨基酸序列与Citrin有77.8%的同源性，但组织分布明显不同，Citrin主要在脏而Aralar 主要在骨骼肌和脑中表达，提示Citrin缺乏症是一种局限于脏的疾病。

Citrin作为内主要的天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白，其功能有3方面；

其一，将线粒体中天冬氨酸转运至胞浆中，参与尿素、蛋白和核酸的合成。

其二，将天冬氨酸转运至胞浆，作为苹果酸/天冬氨酸穿梭的一个环节，将胞浆中糖酵解生成的NADH还原当量运至线粒体内，参与能量、氨基酸、糖和脂代谢。

其三，在NADH形成及利用的同时促进乳糖糖异生。

CTLN2患者多死于，机制尚不明确，高血氨并非*致病因素，局部缺血、能量耗竭、神经毒性及代谢失调引起氧化应激反应，均可加速。CTLN2患者多并发脏，其中大部分为细胞 。体外研究提示瓜氨酸的积聚对细胞的增生有促进作用，游离脂肪酸聚集造成的氧化应激和脂质过氧化反应对发生也有重要作用。

抗体的鉴定：

1）线粒体内钙结合天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白抗体费用 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Anti-CNTFR Alpha/FITC 荧光素标记抗睫状神经营养因子受体α抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-p-Kinesin 5B/FITC 荧光素标记磷酸化 Kinesin 5B 抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CCDC52 卷曲螺旋结构域蛋白52抗体 规格 0.2ml

HIF-2 Alpha (Hypoxia-inducible factor-2 Alpha) 缺氧诱导因子2α 抗原 0.5mg

Histone H3 (Di Methyl K9) 英文名称： 二甲基化组蛋白H3K9抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh SMYD4 组蛋白甲基转移酶SMYD4抗体 规格 0.2ml

Anti-p-Kinesin 5B/FITC 荧光素标记磷酸化 Kinesin 5B 抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-E.coli O139/Gold 胶体金离子标记抗志贺毒素大肠杆菌O139抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Metronidazole/FITC 荧光素标记抗甲硝唑抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C6orf192 8号染色体开放阅读框192抗体 规格 0.2ml

CD62L (ELAM-1/L-Selectin ) L选择素抗原 0.5mg

HN1L 英文名称： 雄激素调节样蛋白抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh SCNN1B/βENaC 上皮通道β抗体 规格 0.2ml

Anti-Metronidazole/FITC 荧光素标记抗甲硝唑抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

IL-28(human Interleukin 28) ELISA Kit 人白介素28Multi-class antibodies规格： 96T

Anti-phospho-GCN2 (Thr667) 磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 规格 0.1ml

VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖 96T

Phospho-Rad17 (Ser645) 英文名称： 磷酸化细胞周期检控Rad17蛋白抗体 0.1ml

CK42 英文名称： 细胞角蛋白42 0.1ml

Anti-phospho-GCN2 (Thr667) 磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

ITGA6 & ITGB1 Others Human 人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照)

人神经束膜细胞总RNAHPC NA

SK-OV-3 人卵巢腺癌细胞

CL-0312293ET(人胚肾细胞(SV40T和EBNA1基因修饰细胞))5×106cells/瓶×2

RN-s, 大鼠纹状体神经元

人上皮样细胞;BEAS-2B 人卵巢上皮细胞完全培养基 100mL

CM-H020人胰岛β细胞完全培养基100mL

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液) 1mL

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒构建稳定株)人 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 灭活血清+2μg/ml puromycin

IL21 Protein Rat 重组大鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 (His 标签)

人表皮角质细胞-新生儿(HEK-n)( 5×105 ) 细胞名称 种属

线粒体内钙结合天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白抗体费用 CM-H019人上皮细胞完全培养基100mL

HA Others H4N4 甲型 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解缓冲液) 1mL

Tca-8113-EGFP(CMV-EGFP慢病毒构建稳定株)人舌鳞癌细胞 Tca-8113-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma 1640+10% FBS

IL13 Protein Mouse 重组小鼠 IL13 / ALRH 蛋白

人表皮黑色素细胞-浅色素(HEM)( 5×105 ) mCF, 小鼠成纤维细胞 Mouse