抗体的生物素化标记实验要点：

1. 泛素蛋白连接酶E1抗体说明书 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-UBCH6/UBE2E1 

中文名称   泛素蛋白连接酶E1抗体说明书 

别    名  UB2E1_HUMAN; UbcH6; UBE2E1; Ubiquitin carrier protein E1; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 E1; Ubiquitin-protein ligase E1.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Sheep 

产品类型   一抗  

研究领域    

蛋白分子量  predicted molecular weight: 21kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human UBCH6/UBE2E1 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

泛素蛋白连接酶E1抗体说明书 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 The ubiquitin (Ub) pathway involves three sequential enzymatic steps that facilitate the conjugation of Ub and Ub-like molecules to specific protein substrates. The first step requires the ATP-dependent activation of the Ub C-terminus and the assembly of multi-Ub chains by the Ub-activating enzyme known as the E1 component. The Ub chain is then conjugated to the Ub-conjugating enzyme (E2) to generate an intermediate Ub-E2 complex. The Ub-ligase (E3) then catalyzes the transfer of Ub from E2 to the appropriate protein substrate. UBE2E1 and UBE2L3, also designated UBCH6 and UBCH7 respectively in human, are E2 conjugating enzymes that interact with various proteins. Specifically, UBE2E1 interacts with the tumor suppressor protein TSSC5. UBE2L3 has been shown to mediate c-fos degradation, NF-kB maturation, human papilloma virus-mediated p53 and Myc protein degradation.

Function : Accepts ubiquitin from the E1 complex and catalyzes its covalent attachment to other proteins. Catalyzes the covalent attachment of ISG15 to other proteins. Mediates the selective degradation of short-lived and abnormal proteins. In vitro also catalyzes 'Lys-48'-linked polyubiquitination.

Subunit : Interacts with RNF14.

Subcellular Location : Nucleus.

Post-translational modifications : ISGylation suppresses ubiquitin E2 enzyme activity.

Similarity : Belongs to the ubiquitin-conjugating enzyme family.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P51965.1

抗体的鉴定：

1）泛素蛋白连接酶E1抗体说明书 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Anti-HSP-27/FITC 荧光素标记HSP-27蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Pin1/FITC 荧光素标记肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ASGPR1/ASGR1 唾液酸糖蛋白受体1抗体 规格 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的驴抗羊IgG 0.1ml

GLT6D1 英文名称： 糖基转移酶6结构1抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗小鼠IgG 规格 0.1ml

Anti-Pin1/FITC 荧光素标记肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Phospho-Gab1 (Tyr627) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化接头蛋白Gab 1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-NOS-2/iNOS /FITC 荧光素标记合成酶-2抗体(诱导型)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BRMS-1 癌转移抑制基因1抗体 规格 0.1ml

Leptin 瘦素(多肽抗原) 0.5mg

HOXA11 英文名称： 同源盒蛋白HOXA11抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh RhoA RhoA抗体 规格 0.1ml

Anti-NOS-2/iNOS /FITC 荧光素标记合成酶-2抗体(诱导型)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

RLN(Human Relaxin) ELISA Kit 人松弛肽/松弛素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-LDL 抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh KNTC1/Kinetochore 着丝点关联蛋白1抗体 规格 0.2ml

MS(Human melatonin sulfate) ELISA Kit 人褪黑色素 96T

Phospho-PSD95 (Tyr236 + Tyr240) 英文名称： 磷酸化突触后密度蛋白95抗体 0.1ml

Calcipressin 3 英文名称： 钙调神经磷酸酶调节蛋白3抗体(唐氏综合征候选区域蛋白1样蛋白3) 0.1ml

Anti-LDL 抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照)

人少突胶质前体细胞-悬浮生长RNAHOPC-os miRNA5 μg

兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBF

HRT-S1细胞，人细胞 人横纹肌细胞,TE671 subline No.2细胞 小鼠源细胞

HL-7702(人肝正常细胞) 5×106cells/瓶×2

BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0451SW-13(人肾上腺皮质癌细胞)5×106cells/瓶×2

CTSS Others Mouse 小鼠 Cathepsin S / CTSS 人细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠角膜上皮细胞完全培养基 100mL

Hep3B人细胞 Hep3B human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS

IL18 Protein Human 重组人 IL18 / Ierleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 标签)

NCI-H520(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 A549 [A-549](细胞)

泛素蛋白连接酶E1抗体说明书 CL-0448SW 1990(人*癌细胞)5×106cells/瓶×2

VSIG4 Others Human 人 VSIG4 人细胞裂解液 (阳性对照)

人骨骼肌成肌细胞RNAHSkMM miRNA5 μg

ScaBER细胞，人膀胱鳞癌细胞 小鼠细胞,C26细胞 RLFs, 大鼠

L-O2(人正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2

NHEK.f single donor Pellet 正常人表皮角质细胞团块(少年者) > 1 mio.cells 小鼠颗粒细胞MGC