抗体的生物素化标记实验要点：

1. 跨膜蛋白166抗体品牌 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-TMEM166 

中文名称   跨膜蛋白166抗体品牌 

别    名  FLJ13391; TMEM 166; Transmembrane protein 166; EVA1A_HUMAN.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse 

产品类型   一抗  

研究领域     细胞生物 免疫学 细胞凋亡

蛋白分子量  predicted molecular weight: 17kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TMEM166 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

跨膜蛋白166抗体品牌 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 TMEM166, also known as FAM176A (family with sequence similarity 176, member A), is a 152 amino acid protein encoded by a gene mapping to human chromosome 2. The second largest human chromosome, 2 consists of 237 million bases encoding over 1,400 genes and making up approximately 8% of the human genome. A number of genetic diseases are linked to genes on chromosome 2. Harlequin icthyosis, a rare and morbid skin deformity, is associated with mutations in the ABCA12 gene. The lipid metabolic disorder sitosterolemia is associated with ABCG5 and ABCG8. An extremely rare recessive genetic disorder, Alstr鰉 syndrome is due to mutations in the ALMS1 gene. Interestingly, chromosome 2 contains what appears to be a vestigial second centromere and vestigial telomeres which gives credence to the hypothesis that human chromosome 2 is the result of an ancient fusion of two ancestral chromosomes seen in modern form today in apes.

Function : Acts as a regulator of programmed cell death, mediating both autophagy and apoptosis.

Subcellular Location : Endoplasmic reticulum membrane; Single-pass membrane protein. Lysosome membrane; Single-pass membrane protein.

Tissue Specificity : Expressed in lung, kidney, liver, pancreas, placenta, but not in heart and skeletal muscle.

Similarity : Belongs to the EVA1 family.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q9H8M9.1

抗体的鉴定：

1）跨膜蛋白166抗体品牌 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571)/FITC 荧光素标记磷酸化马铃薯球蛋白(性硬化)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

cath-B/CB(Cathepsin B) 组织蛋白酶B抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Caspase 激活的脱氧核糖核酸酶抗体 Anti-CAD/CPAN 0.1ml

SIRT3 英文名称： 线粒体乙酰化酶3抗体 0.2ml

EphB2 英文名称： 酪酸蛋白激酶受体B2抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HSP27(Ser78) 磷酸化热休克蛋白27抗体 规格 0.1ml

cath-B/CB(Cathepsin B) 组织蛋白酶B抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-p53BP1/53BP1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠p53结合蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies规格： 0.3ml

C-藻蓝素/藻蓝蛋白抗体 Anti-C-PC 0.1ml

Rabbit Anti-pig IgG/Bio 生物素标记的兔抗猪IgG 0.1ml

FARSLA/CML33 英文名称： 慢性粒细胞33抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PI3 Kinase p110 delta 磷脂酰肌醇激酶催化亚单位D抗体 规格 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies规格： 0.3ml

IFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干扰素-γ多肽抗原(大、小鼠)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-CDC42 细胞分化周期CDC42蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh OMPC 大肠杆菌外膜孔道蛋白C抗体 规格 0.1ml

CST1 Kit Human 人 Cystatin SN / CST1 ELISA配对抗体 ELISA

TTC8 英文名称： 巴尔得-别德尔综合征相关蛋白8抗体 0.1ml

C6orf222 英文名称： 6号染色体开放阅读框222抗体 0.2ml

Anti-CDC42 细胞分化周期CDC42蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CD40LG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)

COLO 205 人细胞

LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人细胞裂解液 (阳性对照)

U-2 OS-EGFP+puro人细胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin

人导管癌细胞;HCC38

人视网膜内皮细胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人上皮细胞系 Human

CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋细胞系)5×106cells/瓶×2

CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照)

人骨骼肌细胞RNAHSkMC miRNA5 μg

兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2 癌细胞，MDA-MB-231细胞 J774A.1细胞，小鼠单核巨噬细胞

人胚肾上皮细胞系;KiMA

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

跨膜蛋白166抗体品牌 CD40LG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)

COLO 205 人细胞

LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人细胞裂解液 (阳性对照)

U-2 OS-EGFP+puro人细胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin

人导管癌细胞;HCC38

人视网膜内皮细胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人上皮细胞系 Human