抗体的生物素化标记实验要点：

1. TRIM35蛋白抗体说明书 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-TRIM35 

中文名称   TRIM35蛋白抗体说明书 

别    名  Hemopoietic lineage switch protein 5; HLS5; KIAA1098; Macrophage derived apoptosis inducing RBCC protein; MAIR; NC8; Protein MAIR; Protein Nc8; Tripartite motif containing 35; Tripartite motif containing protein 35; TRI35_HUMAN.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep 

产品类型   一抗  

研究领域     细胞生物 信号转导 转录调节因子 表观遗传学

蛋白分子量  predicted molecular weight: 57kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TRIM35 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

TRIM35蛋白抗体说明书 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 TRIM35 is a member of the tripartite motif (TRIM) family. The TRIM motif includes three zinc-binding domains, a RING, a B-box type 1, a B-box type 2 and a coiled-coil region. TRIM35 may play a role as a tumor suppressor and is implicated in the cell death mechanism. There are two named isoforms.

Function : May play a role as a tumor suppressor. Implicated in the cell death mechanism (By similarity).

Subcellular Location : Cytoplasm. Nucleus. Found predominantly in cytoplasm with a granular distribution. Found in punctuate nuclear bodies.

Similarity : Belongs to the TRIM/RBCC family.

Contains 1 B box-type zinc finger.

Contains 1 B30.2/SPRY domain.

Contains 1 RING-type zinc finger.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q9UPQ4.2

抗体的鉴定：

1）TRIM35蛋白抗体说明书 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Anti-TRAF6 /FITC 荧光素标记坏死因子受体相关因子6抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 维受体-α 多肽Multi-class antibodies规格： 0.5mg

端粒体复制结合因子1抗体 Anti-TRBF1 1ml

SRD*1 英文名称： 类固醇5α还原酶1抗体(5α-Reductase 1) 0.1ml

ENTPD2 英文名称： CD39样蛋白1抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化受体底物-1抗体 规格 0.1ml

RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 维受体-α 多肽Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-OXR /FITC 荧光素标记整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgM/HRP 辣根过氧化物酶标小鼠抗兔IgMMulti-class antibodies规格： 0.1ml

细胞角蛋白18抗体 Anti-CK18 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗猴IgG 0.1ml

Phospho-c-Fos (Se*) 英文名称： 磷酸化c-fos抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh PIWIL4 piwi样4蛋白抗体 规格 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgM/HRP 辣根过氧化物酶标小鼠抗兔IgMMulti-class antibodies规格： 0.1ml

GABA/KLH γ1氨基偶联血蓝蛋白Multi-class antibodies规格： 1mg

Anti-HER2/C-erbB-2 HER2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh OAT-1/SLC22A6 阴离子转运蛋白-1抗体 规格 0.1ml

Antibody Diluent 抗体稀释液 30ml

TWIST protein 英文名称： TWIST蛋白抗体 0.1ml

C18orf56 英文名称： 18号染色体开放阅读框56抗体 0.1ml

Anti-HER2/C-erbB-2 HER2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

TGFB1 Protein Mouse 重组小鼠 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 标签)

AE-2 杂交瘤细胞抗 AChE

IFNA10 Others Human 人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 人细胞裂解液 (阳性对照)

HuH-7人细胞 HuH-7 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS

二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-

人肾近端小管上皮细胞(HRPTEpiC) MM, 小鼠小胶质细胞 Mouse

CM-H025人*上皮细胞完全培养基100mL

ART4 Others Rat 大鼠 ART4 人细胞裂解液 (阳性对照)

组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml

SK细胞，人细胞 狗肾细胞隆突型,MDCK superdome细胞 少突胶质前体细胞培养基OPCM-prf

MPC-11(小鼠浆细胞瘤) 5×106cells/瓶×2

Bcap-37(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R115大鼠小梁网细胞完全培养基100mL EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-16

TRIM35蛋白抗体说明书 TGFB1 Protein Mouse 重组小鼠 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 标签)

AE-2 杂交瘤细胞抗 AChE

IFNA10 Others Human 人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 人细胞裂解液 (阳性对照)

HuH-7人细胞 HuH-7 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS

二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-

人肾近端小管上皮细胞(HRPTEpiC) MM, 小鼠小胶质细胞 Mouse