抗体的生物素化标记实验要点：

1. 环指蛋白133抗体规格 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-RNF133 

中文名称   环指蛋白133抗体规格 

别    名  E3 ubiquitin protein ligase RNF133; MGC27072; Ring finger protein 133; RNF 133; RN133_HUMAN.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 免疫学

蛋白分子量  predicted molecular weight: 42kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF133 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

环指蛋白133抗体规格 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 RNF133 contains a RING finger domain, a motif known to be involved in protein-protein and protein-DNA interactions. This gene has no intron. RNF133 may have E3 ubiquitin-protein ligase activity.

Function : Has E3 ubiquitin-protein ligase activity (By similarity).

Subcellular Location : Endoplasmic reticulum membrane; Single pass membrane protein.

Post-translational modifications : Auto-ubiquitinated (By similarity).

Similarity : Contains 1 PA (protease associated) domain.

Contains 1 RING-type zinc finger.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q8WVZ7.1

抗体的鉴定：

1）环指蛋白133抗体规格 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

CXCR3/CD183 peptide 细胞表面趋化因子受体3抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

DIABLO SMAC / Diablo 兔单抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser495) 磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体 规格 0.1ml

非预染蛋白Marker分子量标准(3.4-100kDa) 2x250μl/100次 MBI原装

ZBED4 英文名称： 锌指蛋白BED4抗体 0.2ml

Defensin alpha 4 英文名称： 防御素α4抗体 0.1ml

DIABLO SMAC / Diablo 兔单抗 (FITC) Human

Anti-RRAD/FITC 荧光素标记RRAD抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

SP (Substance P) P物质(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

拟南介金属离子转运蛋白抗体 Anti-Metal ion transporter 0.2ml

phospho-Smad3 (Ser204) 英文名称： 磷酸化细胞信号转导分子SMAD3抗体 0.1ml

Fascin-3 英文名称： 肌动蛋白结合蛋白Fascin3抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-PI3K p85/PIK3R1(Tyr368) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗体 规格 0.1ml

SP (Substance P) P物质(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Sauvagine 英文名称： 蛙皮降压肽抗体 0.2ml

phospho-Ephrin B(Ser287) 英文名称： 磷酸化Ephrin B抗体 0.1ml

腺苷A2A受体抗体 Anti-A2AR/Adenosine A2A-R 0.1ml

Anti-WEE1 protein/FITC 荧光素标记WEE1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO4 (Ser193) 磷酸化叉头蛋白4抗体 规格 0.1ml

AU1 tag peptide AU1 tag标签多肽Multi-class antibodies规格： 0.5mg

GREM1 Protein Mouse 重组小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 标签)

Lewis瘤

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

JAR人胎盘绒毛癌细胞 Human placeal villous carcinoma cells JAR DMEM+10%FBS

tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-3A1

人正常来源细胞 PC-12(高分化)，PC12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化) Rattus

CL-03142V6.11(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2

HA Others H7N7 甲型 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人小脑星形胶质细胞总RNAHA-c NA

J82细胞，细胞 人胚肺细胞,WI-38细胞 原代系膜细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml

豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4

WISP1 Others Human 人 WISP1 / CCN4 人细胞裂解液 (阳性对照)

环指蛋白133抗体规格 GREM1 Protein Mouse 重组小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 标签)

Lewis瘤

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

JAR人胎盘绒毛癌细胞 Human placeal villous carcinoma cells JAR DMEM+10%FBS

tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-3A1

人正常来源细胞 PC-12(高分化)，PC12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化) Rattus