抗体的生物素化标记实验要点：

1. RFESD蛋白抗体说明书 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-RFESD 

中文名称   RFESD蛋白抗体说明书 

别    名  Rieske (Fe S) domain containing; Rieske domain containing protein; RFESD_HUMAN.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 免疫学

蛋白分子量  predicted molecular weight: 18kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RFESD 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

RFESD蛋白抗体说明书 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 RFESD, also known as Rieske domain-containing protein, is a 157 amino acid protein that binds one 2Fe-2S cluster per subunit. Involved in metal ion binding, RFESD contains one Rieske domain. The RFESD gene is conserved in chimpanzee, dog, cow, mouse, rat, chicken and zebrafish, and maps to human chromosome 5q15. Chromosome 5 makes up approximately 6% of the human genome and contains 181 million base pairs, which encode 1,000 genes. Chromosome 5 is associated with Cockayne syndrome through the ERCC8 gene and familial adenomatous polyposis through the adenomatous polyposis coli (APC) tumor suppressor gene. Treacher Collins syndrome is caused by insertions or deletions within the TCOF1 gene and is also associated with chromosome 5. Deletion of 5q or chromosome 5 altogether is common in therapy-related acute myelogenous leukemias and myelodysplastic syndrome.

Similarity : Contains 2 Rieske domains.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q8TAC1.1

抗体的鉴定：

1）RFESD蛋白抗体说明书 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡结构域相关蛋白抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

β-酪蛋白(抗体)兔抗山羊、绵羊 Anti-Beta-casein 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体 规格 0.1ml

胎血清(特优级) 500ml Hyclone

ZNF263 英文名称： 锌指蛋白263抗体 0.2ml

DYRK2 英文名称： 双特异性酪酸磷酸化调节激酶DYRK2抗体 0.2ml

β-酪蛋白(抗体)兔抗山羊、绵羊 Anti-Beta-casein 0.1ml

Anti-Tubulin- Gamma/FITC 荧光素标记微管蛋白-γ抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Tubulin-Alpha 微管蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

白细胞分化抗原CD2AP CD2AP 0.5mg

STAT5b 英文名称： 信号转导和转录激活因子5b抗体 0.2ml

Enkephalin 英文名称： 脑啡肽抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-IGF1R(Tyr1161) 磷酸化样生长因子1受体抗体 规格 0.1ml

Tubulin-Alpha 微管蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

ZNF185 英文名称： 锌指蛋白185抗体 0.2ml

DHFRL1 英文名称： 二氢叶酸还原酶样1抗体 0.2ml

生成素-2抗体 Anti-ANG-2 hu, mo, rat, pig, dog, chi 0.1ml

Anti-ZNF217/FITC 荧光素标记锌指脂蛋白217抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537) 磷酸化雌激素受体α抗体 规格 0.1ml

CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 细胞色素P450 3A4抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

TNFSF8 Protein Human 重组人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)

Hep 3B 人细胞

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人细胞裂解液 (阳性对照)

SV-HUC-1人输尿管上皮永生化细胞 SV-HUC-1 human ureter epithelial immortalized cell F12K培养基+10%FBS

斑马鱼尾鳍细胞;AB.9

大鼠背部脊髓神经元(RDSCI)(1×106) Hela, 人细胞系 Human

CL-0391NCI-H205(人肾上腺腺瘤细胞)5×106cells/瓶×2

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人细胞裂解液 (阳性对照)

人羊膜上皮细胞总RNAHAmEpiC NA

SKBr-2HL细胞，人癌细胞 鸡胚原代肝细胞,CEL细胞 SGC-7901, 人胃腺癌细胞系

MuM-2C(人眼脉络细胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC pre-screened Pellet 人脐内皮细胞(预选型) > 1 mio.cells 角质细胞培养基KM-acf

RFESD蛋白抗体说明书 TNFSF8 Protein Human 重组人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)

Hep 3B 人细胞

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人细胞裂解液 (阳性对照)

SV-HUC-1人输尿管上皮永生化细胞 SV-HUC-1 human ureter epithelial immortalized cell F12K培养基+10%FBS

斑马鱼尾鳍细胞;AB.9

大鼠背部脊髓神经元(RDSCI)(1×106) Hela, 人细胞系 Human