抗体的生物素化标记实验要点：

1. 环指蛋白123抗体规格 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-RNF123 

中文名称   环指蛋白123抗体规格 

别    名  E3 ubiquitin protein ligase RNF123; Kip1 ubiquitination promoting complex protein 1; KPC 1; KPC1; Ring finger protein 123; RNF 123; Ubiquitin ligase;

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 免疫学

蛋白分子量  predicted molecular weight: 149kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF123 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

环指蛋白123抗体规格 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 The RING-type zinc finger motif is present in a number of viral and eukaryotic proteins and is made of a conserved cysteine-rich domain that is able to bind two zinc atoms. Proteins that contain this conserved domain are generally involved in protein-protein interactions and protein-DNA interactions. RNF123 (RING finger protein 123), also known as KPC1 (Kip1 (p27) ubiquitination-promoting complex protein 1) or FP1477, contains one RING-type zinc finger domain and one SPRY domain. Localizing to the cytoplasm, RNF123 functions as the catalytic component of the KPC complex that acts as an E3 ubiquitin-protein ligase. Specifically, RNF123 is essential for the ubiquitination and subsequent degradation of p27 during the cell cycle G1 phase. Via its N-terminus, RNF123 is known to interact with GBDR1 (another component of the KPC) and p27 (a cyclin-dependent kinase inhibitor). Due to alternative splicing events, two isoforms exist for RNF123.

Function : Catalytic subunit of the KPC complex that acts as E3 ubiquitin-protein ligase. Required for poly-ubiquitination and proteasome-mediated degradation of CDKN1B during G1 phase of the cell cycle.

Subunit : Component of the KPC complex composed of RNF123/KPC1 and UBAC1/KPC2. Interacts with UBAC1 and CDKN1B via its N-terminal domain.

Subcellular Location : Cytoplasmic

Post-translational modifications : Ubiquitinated, leading to its degradation. Deubiquitinated by USP19, thereby stimulating CDKN1B ubiquitin-dependent degradation (By similarity).

Similarity : Contains 1 B30.2/SPRY domain.

Contains 1 RING-type zinc finger.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q5XPI4.1

抗体的鉴定：

1）环指蛋白123抗体规格 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纤维母细胞生长因子4抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

脑素/利肽抗体 Anti-BNP 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-E2F1 (Ser332) 磷酸化转录因子E2F-1抗体 规格 0.1ml

纤维素膜(30cm×3m 0.45um) 1卷 Whatman

ZNF281 英文名称： 锌指蛋白281抗体 0.2ml

DEF6/IBP 英文名称： 干扰素调节因子4结合蛋白抗体 0.2ml

脑素/利肽抗体 Anti-BNP 0.1ml

Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 荧光素标记磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

VTG(vitellogenin) 青鳉鱼卵黄蛋白Multi-class antibodies规格： 0.1mg

细胞核因子/k基因结合核因子抗体 Anti-NFKBp65 0.1ml

SCUBE1 英文名称： 新型血小板相关内皮分泌蛋白SCUBE1抗体 0.2ml

EV71 polyprotein VP1 英文名称： 肠道病毒71型抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-p95 NBS1(Ser343) 磷酸化滑膜细胞凋亡抑制物1抗体 规格 0.1ml

VTG(vitellogenin) 青鳉鱼卵黄蛋白Multi-class antibodies规格： 0.1mg

ZBTB7C 英文名称： 锌指蛋白ZBTB7C抗体 0.2ml

DNTNP 英文名称： 背神经管核蛋白抗体 0.2ml

膜粘连蛋白 Ⅱ抗体 Anti-Annexin Ⅱ 0.1ml

Anti-ZNF474/FITC 荧光素标记锌指蛋白474抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK5(Ser496) 磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体 规格 0.1ml

DRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受体-D5抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

TNFSF11 Protein Human 重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签)

HEC-1-A 人子宫内膜腺癌细胞

LSAMP Others Human 人 LSAMP 人细胞裂解液 (阳性对照)

Caki-1人肾透明细胞癌细胞 Caki-1 in human renal clear cell carcinoma of skin metastasis cell McCOY's *+10%FBS

人胚肾细胞;293 [HEK-293]

大鼠神经黑质细胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位*腺癌细胞株 Human

CL-0398NCI-H2452(人间皮瘤细胞)5×106cells/瓶×2

CD22 Others Mouse 小鼠 Siglec-2 / CD22 人细胞裂解液 (阳性对照)

人脑膜细胞RNAHMC miRNA5 μg

家兔肾细胞;RABK3 细胞，COLO 205细胞 U14-GFP细胞，绿色荧光蛋白标记小鼠子细胞

人肺转化细胞;AE1201

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

环指蛋白123抗体规格 TNFSF11 Protein Human 重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签)

HEC-1-A 人子宫内膜腺癌细胞

LSAMP Others Human 人 LSAMP 人细胞裂解液 (阳性对照)

Caki-1人肾透明细胞癌细胞 Caki-1 in human renal clear cell carcinoma of skin metastasis cell McCOY's *+10%FBS

人胚肾细胞;293 [HEK-293]

大鼠神经黑质细胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位*腺癌细胞株 Human