抗体的生物素化标记实验要点：

1. E3泛素蛋白连接酶144A抗体费用 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-RNF144 

中文名称   E3泛素蛋白连接酶144A抗体费用 

别    名  Probable E3 ubiquitin protein ligase RNF144A; Probable E3 ubiquitin-protein ligase RNF144A; R144A_HUMAN; Ring finger protein 144; RING finger protein 144A; RNF 144; RNF 144A; RNF144A; UBCE7IP4; UbcM4 interacting protein 4; UbcM4-interacting protein 4; Ubiquitin conjugating enzyme 7 interacting protein 4; Ubiquitin-conjugating enzyme 7-interacting protein 4.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 免疫学 信号转导

蛋白分子量  predicted molecular weight: 33kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF144 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

E3泛素蛋白连接酶144A抗体费用 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 E3 ubiquitin-protein ligase which accepts ubiquitin from E2 ubiquitin-conjugating enzymes UBE2L3 and UBE2L6 in the form of a thioester and then directly transfers the ubiquitin to targeted substrates.

Function : E3 ubiquitin-protein ligase which accepts ubiquitin from E2 ubiquitin-conjugating enzymes UBE2L3 and UBE2L6 in the form of a thioester and then directly transfers the ubiquitin to targeted substrates (By similarity).

Subunit : Interacts with UBE2L3.

Subcellular Location : Membrane; Single-pass membrane protein (Potential).

Similarity : Belongs to the RBR family. RNF144 subfamily.

Contains 1 IBR-type zinc finger.

Contains 2 RING-type zinc fingers.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P50876.2

抗体的鉴定：

1）E3泛素蛋白连接酶144A抗体费用 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人磷酸化雌激素受体α多肽抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

自分泌运动因子抗体 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1016) 磷酸化表皮生长因子受体抗体 规格 0.1ml

Neurobasal Medium 500ml Gibco

ZNF516 英文名称： 锌指蛋白516抗体 0.2ml

DR4/ 英文名称： 死亡受体4抗体 0.1ml

自分泌运动因子抗体 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 0.1ml

ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 磷酸化雌激素受体α抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

极光激酶B抗体 Anti-Aurora B 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Thr693) 磷酸化表皮生长因子受体抗体 规格 0.1ml

D-MEM/F-12培养基(原装) 10×1L Gibco

ZNF532 英文名称： 锌指蛋白532抗体 0.2ml

DR3 英文名称： 死亡受体3抗体 0.1ml

极光激酶B抗体 Anti-Aurora B 0.1ml

ZSWIM2 英文名称： E3泛素蛋白连接酶ZSWIM2抗体 0.2ml

DUSP7 英文名称： 双特异性蛋酸酶7抗体 0.2ml

N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 Anti-APNG/MPG 0.1ml

Anti- Alpha-AF/ Alpha-Afa/FITC 荧光素标记α-L-阿拉伯糖苷酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596) 磷酸化内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗体 规格 0.1ml

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 细胞调亡素/死亡受体5抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

TNFSF15 Protein Rat 重组大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 标签)

FaDu 人咽鳞癌细胞

Spike Others Human coronavirus 人冠状病毒 spike glycoprotein (aa 1-760) 人细胞裂解液 (阳性对照)

Caco-2人结直肠腺癌细胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS

人恶性多发性;ERA-2

人卵巢微内皮细胞(HOMEC) ( 5×105 ) Saos-2，人成细胞 Human

CL-0422RBL-1(大鼠嗜碱性粒细胞性细胞)5×106cells/瓶×2

CD40LG Others Canine 狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 人细胞裂解液 (阳性对照)

人基质细胞RNAHHGMC miRNA5 μg

兔肾细胞;RK-13 细胞，KG-1细胞 MFC-GFP细胞，绿色荧光蛋白标记小鼠前细胞

人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKIN

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

E3泛素蛋白连接酶144A抗体费用 TNFSF15 Protein Rat 重组大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 标签)

FaDu 人咽鳞癌细胞

Spike Others Human coronavirus 人冠状病毒 spike glycoprotein (aa 1-760) 人细胞裂解液 (阳性对照)

Caco-2人结直肠腺癌细胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS

人恶性多发性;ERA-2

人卵巢微内皮细胞(HOMEC) ( 5×105 ) Saos-2，人成细胞 Human