产品名称：人B细胞，RAMOS细胞说明书
规格 ：1 x 10^6 cells/T25培养瓶
细胞特性
1）来源：血液

2）形态：淋巴母细胞样，悬浮生长

3）含量：>1x106 个/mL

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

人B细胞，RAMOS细胞说明书细胞接受后的处理：
1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3）弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。
4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备基础培养基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸钠 0.11g/L)；优质胎牛血清，10%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
1.一般客户拿到细胞后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
CD40LG Protein Canine 重组狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)

CNE-1 高分化细胞

CD96 Others Mouse 小鼠 CD96 人细胞裂解液 (阳性对照)

P9-EGFP-puro小鼠骨髓基质细胞 P9-EGFP-puro mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+1%P/S

小鼠成肌细胞;C2C12

人心肌细胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 Mouse
CL-0459U14(小鼠子细胞)5×106cells/瓶×2

CN3 Others Mouse 小鼠 Coactin 3 / CN3 人细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠晶状体上皮细胞完全培养基 100mL

EB (NBL-4)牛胚气管细胞 EB (NBL-4) of bovine embryo acheal cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS

IL36G Protein Mouse 重组小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 标签)

NCI-H446(人小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa(细胞)
CD40LG Protein Canine 重组狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)

CNE-1 高分化细胞

CD96 Others Mouse 小鼠 CD96 人细胞裂解液 (阳性对照)

P9-EGFP-puro小鼠骨髓基质细胞 P9-EGFP-puro mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+1%P/S

小鼠成肌细胞;C2C12

人心肌细胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 Mouse
三糖铁琼脂(TSI)22080250g用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应

7521-prf MSCM-acf-prf 间充质干细胞培养基 500 ml incubation media 7521-prf MSCM-acf-prf 间充质干细胞培养基 500 ml

LactoseBileBroth

葡萄球菌增菌肉汤250g用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌

发光菌培养基 250g 用于发光菌的分离培养。
三聚氰胺标准品用于检测*奶粉中三聚氰胺的含量。

T1N1琼脂 T1N1 Agar 用于霍乱弧菌的培养(SN标准)

酵母氮源-无氨基酸 YNB 100g BR

溶菌酶营养肉汤基础250g/瓶用于蜡样芽胞杆菌的溶菌酶试验，每200ml培养基中加入incubationmedia溶菌酶营养肉汤基础250g/瓶用于蜡样芽胞杆菌的溶菌酶试验，每200ml培养基中加入1209

营养肉汤(日本标准) 250g 用于一般细菌培养、转种、复壮、增菌等
人B细胞，RAMOS细胞说明书大豆胨酵母浸粉琼脂(PYE)250g用于真菌的选择性分离培养

BPL琼脂 250(g) incubation media BPL琼脂 250(g)

1% NaC1甘露醇发酵管 1% NaC1甘露醇发酵管 20支 BR

玫瑰红琼脂250用于霉菌、酵母菌计数incubationmedia玫瑰红琼脂250用于霉菌、酵母菌计数

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人B细胞，RAMOS细胞说明书细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。