停乳链球菌探针法荧光定量PCR试剂盒样品RNA的抽提

停乳链球菌探针法荧光定量PCR试剂盒样品RNA的抽提:

①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。

③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。

④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。

巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)重组蛋白
巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)重组蛋白
巨噬细胞移动抑制因子(MIF)重组蛋白
抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重组蛋白
抗缪勒管激素(AMH)重组蛋白
抗增生抗体靶分子1(TAPA1)重组蛋白
抗增殖细胞核抗原(PCNA)重组蛋白
颗粒酶A(GZMA)重组蛋白
颗粒酶B(GZMB)重组蛋白
颗粒酶H(GZMH)重组蛋白
颗粒酶K(GZMK)重组蛋白
克拉拉细胞蛋白16(CC16)重组蛋白
醌NADH脱氢酶1(NQO1)重组蛋白
酪氨酸酶(TYR)重组蛋白
类固醇5α还原酶1(SRD5α1)重组蛋白
类胰蛋白酶(TPS)重组蛋白
粒细胞集落刺激因子(GCSF)重组蛋白
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)重组蛋白
连环蛋白β1(CTNNβ1)重组蛋白
连接附着分子3(JAM3)重组蛋白
亮氨酰氨基肽酶(LAP)重组蛋白
淋巴细胞功能关联抗原3(LFA3)重组蛋白
磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)重组蛋白
磷脂酶A1(PLA1)重组蛋白