植物种属鉴定 PCR Mix 11100 次操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
磷酸化KLF5抗体
现货供应
英文名称：
phospho-KLF5
特异性钾离子通道蛋白抗体
现货供应
英文名称：
ERG/KCNH2
沉默驱动蛋白KIF4A抗体
现货供应
英文名称：
KIF4A
ATP敏感钾离子通道蛋白抗体
现货供应
英文名称：
kir 6.1
KIAA1462蛋白抗体
现货供应
英文名称：
KIAA1462
KIAA1549蛋白抗体
现货供应
英文名称：
KIAA1549
基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体C端
现货供应
英文名称：
KRV-VP1+KRV-VP2
Kelch样蛋白20抗体
现货供应
英文名称：
KLHL20
激肽释放酶抑制剂抗体
现货供应
英文名称：
KLST
kelch样蛋白7抗体
现货供应
英文名称：
KLHL7
TWIK相关酸敏感钾离子通道蛋白9抗体
现货供应
英文名称：
KCNK 9
激肽释放酶6抗体
现货供应
英文名称：
KLK6
激肽释放酶8抗体
现货供应
英文名称：
KLK8
血浆激肽释放酶抗体
现货供应
英文名称：
KLKB1
磷酸化抑癌蛋白EZH2抗体
现货供应
英文名称：
phospho-EZH2
组蛋白去甲基化酶JARID1B抗体
现货供应
英文名称：
KDM5B
硫酸角质素抗体
现货供应
英文名称：
Keratan Sulfate
角质细胞生长因子调节蛋白2抗体
现货供应
英文名称：
KRG2
钾离子通道蛋白G蛋白4抗体
现货供应
英文名称：
KCNG4
钾通道多聚体结构域KCTD18抗体
现货供应
英文名称：
KCTD18
胞质接头蛋白Keap1
现货供应
英文名称：
KEAP1
舞蹈症相关蛋白KALRN抗体
现货供应
英文名称：
KALRN
细胞内流钾通道蛋白Kir4.1抗体
现货供应
英文名称：
Kir4.1
