GV3101（pSoup）电击感受态细胞培养操作规程

GV3101（pSoup）电击感受态细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

小鼠Flt3配体(mouse Flt3 Ligand)
小鼠纤维连结蛋白(mous FN)
小鼠Fractalkine（mouse Fractalkine）
小鼠凝血因子X(mouse FX)
小鼠纤维蛋白原(mouse Fibrinogen)
小鼠Foxp3(mouse Foxp3)
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)
小鼠胃泌素(mouse Gastrin)
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)
小鼠胰高血糖素样肽-1(mouse GLP-1)
小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)
小鼠GRO(mouse GRO)
小鼠神经胶质细胞衍化营养因子(mouse GDNF)
小鼠生长因子(mouse GH)
小鼠心肌转录因子3(mouse GATA3)
小鼠心肌转录因子4(mouse GATA4)
小鼠低氧诱导因子1α(mouse HIF-1α)
小鼠热休克蛋白60(mouse Hsp-60)
小鼠组胺(mouse HIS)
小鼠肝生素(mouse HGF)
小鼠糖化血红蛋白(mouse HbA1c)