鸭坦布苏病毒E蛋白酶联免疫试剂盒准备试剂与收集血样:
双重核酸试剂盒(荧光PCR法) 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月。
巨大芽孢杆菌
腐败希瓦氏菌
开菲尔乳杆菌
浑浊红球菌
香茅醇假单胞菌
解肝磷脂土地杆菌
红平红球菌
土生拉乌尔菌(土生克雷伯菌)
解藻弧菌(溶藻弧菌)
洋葱伯克霍尔德氏菌
霍乱弧菌
日勾维肠杆菌
施氏假单胞菌
表皮葡萄球菌
拜氏梭菌
马链球菌兽疫亚种
坏死梭杆菌坏死亚种
泛养副球菌
解淀粉芽孢杆菌
乳酸片球菌
戊糖片球菌
朝鲜芽孢八叠球菌
宋氏志贺氏菌
木醋杆菌
明亮发光杆菌
空肠弯曲杆菌
嗜酸乳杆菌
干酪乳杆菌
耐盐芽孢杆菌
无乳链球菌
德氏乳杆菌乳酸亚种(莱氏曼氏乳杆菌)
斯氏李斯特氏菌
侧孢短芽孢杆菌
乳酸乳球菌乳亚种
牙龈卟啉单胞菌