狐狸降钙素ELISA检测试剂盒操
作步骤:
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
5637, 人膀胱癌细胞
CNE1, 人鼻咽癌细胞系
HT-29, 人结肠癌细胞
T24, 人膀胱癌细胞
5-8F, 人高转移鼻咽癌细胞系
HCT116, 人结直肠癌细胞
LncaP, 人前列腺癌细胞
6-10B, 人鼻咽癌细胞系
lovo, 人结肠癌细胞
DU 145, 人前列腺癌细胞
Hep-2, 人喉癌细胞系
MDA-MB-231, 人乳腺癌细胞
HL-60, 人早幼粒白血病细胞
CaEs-17, 人食管癌细胞株
MG-63, 人骨肉瘤细胞
kasumi-1, 人白血病细胞株
RBE, 人肝胆管癌细胞
MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞
KM3, 人多发性骨髓瘤细胞
QGY-7701, 人肝癌细胞
PANC-1, 人胰腺癌细胞
U266B1 [U266], 人多发性骨髓瘤细胞
Hep G2, 人肝癌细胞系
PC-12(高分化)，PC12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)
GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤
Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞
QBC-939, 人胆管癌细胞
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞
SGC-7901, 人胃腺癌细胞系
SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞
