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正常大鼠肾细胞;NRK复苏操作要点

发表时间:2021-07-22
正常大鼠肾细胞;NRK复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

该细胞只能用于科研,不得用于临床应用公司细胞库细胞株种类齐全:大鼠腹水癌细胞、肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株,如:人滑膜细胞,人胃癌细胞,人宫颈癌细胞,人肾近曲小管上皮细胞,肝癌细胞,心肌细胞,子宫内膜细胞等。细胞状态良好,饱满,光泽度好,价格优惠,专业技术指导,另有细胞培养类产品胎牛血清、小牛血清、DMSO、双抗、胰酶、DMEM、1640培养基、细胞培养瓶等产品。欢迎广大科研用户!

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