野生型人c-kit受体细胞株培养培养步骤

野生型人c-kit受体细胞株培养培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)ELISA试剂盒
松弛肽/松弛素(RLN)ELISA试剂盒
松弛素(RLN)ELISA试剂盒
四氢生物蝶呤(BH4)ELISA试剂盒
四连接素(CLEC3B)ELISA试剂盒
死亡相关蛋白1(DAP/DAP1)ELISA试剂盒
丝状血球凝集素(FHA)ELISA试剂盒
丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA试剂盒
丝裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)ELISA试剂盒
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)ELISA试剂盒
丝氨酸肽酶2甘露聚糖结合凝集素(MASP2)ELISA试剂盒
丝氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G(Serpina3g)ELISA试剂盒
丝氨酸蛋白酶HTRA1(HTRA1)ELISA试剂盒
丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒
丝氨酸/苏氨酸激酶24(STK24)ELISA试剂盒
丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PAK4(PAK4)ELISA试剂盒
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B-raf(BRAF)ELISA试剂盒
水蛭素(HRD)ELISA试剂盒
水闸蛋白14(CLDN14)ELISA试剂盒
水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒
水通道蛋白4抗体(AQP-4 Ab)ELISA试剂盒
水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒