SV40转化的非洲绿猴肾细胞培养细抱冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细抱胞六存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具依细胞的产品说明书。
1.配制」存培养基,于2C至8°C下储存,夏至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于用细系。
2冻存贴壁细抱胞,利用传代时所月方法轻柔地使细胞从廷织培养容器上脱离下来。用该细抱所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝染法或普使用 Countess(⑤自动细计数仪测定总细態数和活细百分比。根据所需活细
4.以大约100-200X9的离心力将細胞暴液楽心5至10分钟。在无条件下小心钥持掉上清液,不要搅动细抱胞沉定。
注:心速度和时?取决于细种类
5.月预冷的冻存培养基重新暴浮细胞沉,将其调至该细抱适会的活细胞密度。冻细胞,使涅度每分钟大约降低1C。或者,将装有細胞的冻存管放入冻存倉中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
