伏马毒素检测试剂盒试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
实验开始前,用去离子水将20×浓缩洗涤液按20倍稀释成工作洗涤液。
1 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2 加样反应:加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。
3 洗 涤:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用工作洗涤液250μl/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。
4 显 色:每孔加入底物液A 50μl,再加底物液B 50μl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟。
5 终 止:每孔加入终止液50μl,轻轻振荡混匀,终止反应。
6 测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。