原代培养时,如果上皮细胞和成纤维细胞为分区成片混杂生长,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。可采用机械的方法去除不需要的细胞区域而保留需要的细胞区域,其方法如下:
(1)将要纯化细胞的培养瓶,在净化室内放在倒置显微镜监视下进行。
(2)用硅橡皮刮子在不需要生长的细胞区域推划,使细胞悬浮在培养液中,注意不要伤及所需细胞。
(3)推划后用培养液冲洗振摇两次倒掉,即可将培养基加入原瓶继续培养。
(4)数日后如发现不需要的细胞又长出,可再进行上述操作,这样反复多次可以纯化细胞。操作过程中要严格无菌操作,防止污染。