免疫途径应是多种多样的，如静脉、腹腔、肌肉、皮内、皮下和淋巴结等，但肌肉和皮内两种途径较少应用。目前一般倾向于小剂量、多点、多途径的方法，但具体应视抗原的生物学特性和理化特性来决定。酶、毒素等生物活性抗原，一般不宜采用静脉注射。球蛋白抗原免疫可选用皮下、皮内和肌肉注射。但效价不高，因此大都选用抗原加弗氏佐剂、足掌皮下注射的方法，或者注卡介苗使腘淋巴结肿胀，然后直接注入腘淋巴结内的方法，增强抗体的产生。
足掌注射为近年来常用的免疫途径，能获得相当良好的效果，但剂量不宜过大，一般家兔0.2～0.5mL，否则肿胀严重。有的采用先经足掌内注射卡介苗（后足掌各注 0.2～0.5mL）。10～14d后，腘淋巴结肿大，然后向淋巴结内注射加有完全佐剂的抗原，两侧各0.5mL左右，半个月后再注射不加佐剂的抗原（3mg/mL）皮下或肌肉多点注射，每点0.1mL，总量0.5mL左右、这样免疫效果较为理想。
注射次数可分为一次注射和多次注射两种。一次注射，抗体产生的慢，效价低，但特异性高，如果再次注射，抗体产生的快，效价高，持续时间也较久。多次注射，可得高效价血清，但往往特异性较差．多次免疫的间隔时间，可因抗原性质不同而异。
